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江苏农业科学 2011年第39卷第5期

汤东生，王

斌，毛忠顺，等．石榴园常用除草剂和杀菌剂对石榴枯萎病菌和枯草芽孢杆菌生长的影响[J]．江苏农业科学，2011，39(5)：154—156

石榴园常用除草剂和杀菌剂对石榴枯萎病菌 和枯草芽孢杆菌生长的影响

汤东生，王 斌，毛忠顺，李成云

(云南农业大学教育部生物多样性与植物病虫害控制重点实验室，云南昆明650201)

摘要：在室内培养条件下测定了石榴常用杀菌剂甲基硫菌磷、咪鲜胺、百菌清、三唑酮、氟硅唑和除草剂草甘膦、 百草枯对石榴枯萎病菌和枯草芽孢杆菌的作用效果。结果表明，所有杀菌剂均能有效抑制石榴枯萎病菌的生长，但对 枯草芽孢杆菌的作用差异较大。甲基硫菌磷和咪鲜胺对枯草芽孢杆菌的抑制作用较弱，而其他杀菌剂的抑制作用较 强。所有除草剂均对石榴枯萎病菌有较弱的抑制作用；而高浓度除草剂对枯草芽孢杆菌有极强的抑制作用，低浓度除 草剂有一定的促生长作用。由此可见，杀菌剂的使用对石榴枯萎病的生物防治影响较弱，但除草剂的使用却对石榴枯 萎病的生物防治有十分明显的影响。

关键词：杀菌剂；除草剂；生物防治；石榴枯萎病；枯草芽孢杆菌

中图分类号：S436．65 文献标志码：A

文章编号：1002—1302(2011)05—0154—02

云南省蒙自县是我国六大石榴主产区之一，素有“中国 石榴之乡”的美誉 J。近年来随着石榴成片种植面积的增大 和树龄的增长，由甘薯长喙壳(Ceratocystisfimbriata)等病原 物引起的石榴枯萎病越来越严重 。石榴枯萎病是一种危 害极为严重的毁灭性土传病害，很容易造成整个石榴园的毁 灭，使石榴产业蒙受巨大损失，堪称石榴的“癌症”。寻找一 种经济安全的方式控制石榴枯萎病十分必要。利用拮抗菌防 治作物病害，是一种不污染环境、对生态环境影响小的防治方 法。枯草芽孢杆菌是近年来在我国应用较为广泛的生物防治 细菌，对许多病害防治卓有成效 。 。由于化学农药见效快、 使用方便、节省劳动成本，目前仍是防治农田有害生物的首选 方式。在蒙自石榴种植区，化学除草是农民普遍采用的清除 田间杂草的方式，同时使用杀菌剂防治石榴枯萎病等石榴病 害。这些农药进入果园土壤之中，对土壤微生物群落产生重 要的影响 。田间大量使用的杀菌剂和除草剂是否会对生 防细菌的活性产生影响，需要深入分析。本研究初步探讨田 间常用的杀菌剂和除草剂对石榴枯萎病菌及其生防菌枯草芽 孢杆菌生长的影响，进而评价化学农药的使用对枯草芽孢杆 菌防治石榴枯萎病的影响。

1 材料与方法

1．1 供试茵种

• 石榴枯萎病菌(c fimbriata)、枯草芽孢杆菌(Bacillus

• subtilis，BS—Y2)均由云南农业大学植物病理重点实验室 提供。

收稿Et期：2010—11—17 基金项目：国家“973”计划(编号：2011C8100400)。 作者简介：汤东生(1978一)，男，湖北保康人，博士，主要从事植物生 理生态学研究。E—mail：eastuptang@126．com。 通信作者：李成云，教授，博士生导师。E—mail：li．chengyun@ gmail．

1．2 供试药剂 供试药剂及厂家见表1。

表1 供试药剂及厂家

• 1．3 农药对石榴枯萎病茵生长影响的测定

按照体积比，液体PSA培养基与稀释后配制好的各浓度 药剂体积比均设为9：1(63 mL：7 mL)，共70 mL含药剂的 PSA培养基倒平板5皿。以灭菌蒸馏水作为对照，采用菌丝 生长速率法测定菌丝生长 。

1．4 农药对枯草芽孢杆菌生长影响的测定

按照体积比，液体NA培养基与稀释后配制好的各浓度 药剂体积比均设为9：1(45 mL：5 mL)。以灭菌蒸馏水作为 对照，采用平板菌落计数法 和测定菌悬液的吸光度D值确 定菌液的浓度。

• 2 结果与分析

• 2．1 农药对石榴枯萎病茵的作用

毛忠顺等” 、邓吉等 已证明，许多杀菌剂在室内离体 试验对石榴枯萎病菌均有较好的杀菌作用。本试验选用的几 种杀菌剂甲基硫菌磷、咪鲜胺、百菌清、三唑酮和氟硅唑在浓 度分别高于1、0．1、10、10、0．1 mg／L(有效成分浓度，全文同) 的情况下对病菌的抑制效果可达50％以上(表2)。结果表 明，咪鲜胺和氟硅唑是2种效果非常好的防治石榴枯萎病菌 的药剂。本试验显示出与前人相似的研究结果。

用除草剂清理果园杂草是一种快捷有效的防治杂草的措 施，能减少杂草与果树争肥争水。表3表明，当浓度达到

汤东生等：石榴园常用除草剂和杀菌剂对石榴枯萎病菌和枯草芽孢杆菌生长的影响

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注：药剂浓度c1至C5是有效成分浓度，甲基硫菌磷的浓度分别为1O、1、0．1、0．01、0．00l mg／L，咪鲜胺和氟硅唑的浓度分别为1、0．1、 0．01、0，001、0．000 1 mg／L，百菌清和三唑酮的浓度分别为100、10⋯1 0 1、0．Ol mg／L。

10 mg／L时，草甘膦和百草枯对石榴枯萎病菌抑制率可达 20％左右。由此可见，果园使用除草剂对土传病害也有较弱 的防治作用。

表3 不同除草剂对石榴枯萎病菌菌丝生长的影响

作用逐渐增强。由此可见，石榴园使用除草剂显著影响生防 菌枯草芽孢杆菌活性的发挥。

表4 不同除草剂对枯草芽孢杆菌增殖的影响

2．2 农药对枯草芽孢杆菌的作用

土壤环境条件是枯草芽孢杆菌发挥生物防治效果的关 键。作为果园经常使用的生物杀伤剂，除草剂与杀菌剂或多 或少影响着枯草芽孢杆菌的活性。表4表明，枯草芽孢杆菌 对除草剂非常敏感。草甘膦和百草枯浓度高于1 mg／L时，对 枯草芽孢杆菌的抑制率显著增强，在10 mg／L的浓度下抑制 率在98％以上。当浓度低于0．1 mg／L时，除草剂对枯草芽 孢杆菌几乎没有抵制作用，相反随着浓度进一步降低，其促生

由表5可知，所使用的5种杀菌剂虽然对石榴枯萎病菌 产生了非常相似的杀菌效果，然而对枯草芽孢杆菌的效果不 同。甲基硫菌磷的浓度从10—0．001 ml／L、咪鲜胺的浓度从 1—0．000 1 mg／L对枯草芽孢杆菌的抑制作用不明显，相反， 在低浓度时2种药剂都表现出轻微的促进作用。百菌清和三 唑酮对枯草芽孢杆菌的作用效果与对石榴枯萎病菌的相似， 在高浓度时抑制效果都十分显著，但在极低浓度下表现出较 高的促生活性。尽管氟硅唑是一种较好的杀真菌剂，但对枯 草芽孢杆菌的抑制作用不太显著。

表5 不同杀菌剂对枯草芽孢杆菌增殖的影响

注同表2。

3 结论与讨论

减少农药的使用量或不使用农药是作物有害生物管理的 目标。在大规模单一集约化种植体系和农药风险普遍不高的 联合作用下，化学农药还将存在相当长的一段时期。然而，使 用生物农药是社会、经济和可持续农业发展的要求，是提高农 产品品质和农产品经济价值的重要途径。评价石榴园常用除

草剂和杀菌剂对生物防治菌活性的影响，是研究如何提高生 物细菌使用效率的基础。

本研究表明，杀菌剂甲基硫菌磷、咪鲜胺、百菌清、三唑酮 及氟硅唑对石榴枯萎病菌的抑制作用都非常明显。相对杀菌 剂而言，草甘膦和百草枯对石榴枯萎病菌的抑制作用就显得 较弱。杀菌剂甲基硫菌磷和咪鲜胺对枯草芽孢杆菌无明显抑 (下转第156页)