核酸提取或纯化试剂说明书
【 自备试剂 】
若购买的是 BSC34S1 和 BSC34M1，请自备无水乙醇（分析纯）。
【 产品名称 】核酸提取或纯化试剂（商品名：MagaBio 干血斑基因组DNA 纯化试剂盒）
（英文名称：MagaBio Blood Spots Genomic DNA Purification Kit）
【 包装规格 】32 人份/盒、50 人份/盒、100 人份/盒
【 预期用途 】提取干血斑中的基因组 DNA。
【 储存条件及有效期 】
1） 试剂盒可在常温下运输。
2） 试剂盒保存：试剂盒 2℃-8℃保存。
3） 有效期：本试剂盒有效期12 个月，请在有效期内使用。
【 适用仪器 】
磁性分离架或博日NPA-32+核酸纯化仪，恒温金属浴或恒温水浴，漩涡振荡器。
【 检验原理 】
【 样本要求 】
干血斑中的 DNA 在独特的缓冲系统、裂解液和蛋白酶 K 的作用下被释放出来，在结合 液的存在下，释放出来的 DNA 特异性的结合在磁珠上，结合了 DNA 的磁珠粒子被磁性材料 捕获，通过洗涤过程将污染物除去，最后在洗脱液的作用下将 DNA 从磁珠上洗脱下来并收 集保存。
样本：按照滤纸干血斑采集方法进行采集。
样本保存：经上述采集的待测样本可立即用于处理，或在密封，干燥（湿度低于30%），
- 2～8℃条件下保存（此条件下可保存5 年）。样本运送时应将滤纸干血斑密封，采用泡沫箱 加冰运输。
【 主要组成成份 】
【 检验方法 】
| 货号 | BSC34S1C | BSC34S1 | BSC34M1 | |
|---|---|---|---|---|
| 试剂盒组成 | 32 人份 | 50 人份 | 100 人份 | 成份 |
| TES缓冲液 | 11ml | 17.5 ml | 17.5ml×2 | 缓冲溶液 |
| 蛋白酶K | 320μl | 500μl | 1ml | 蛋白酶K溶液 |
| 裂解液 | 25 ml | 50ml | 表面活性剂和Tris 缓冲液 | |
| 去蛋白漂洗液 | ※10.5 ml | ※18.9 ml | 高盐溶液 | |
| 洗涤液 | 96孔试剂板 块 |
※12.6 ml | ※12.6 ml×2 | 低盐溶液 |
| 洗脱液 | 2 | 10 ml | 20ml | 低盐溶液 |
| 磁珠 | 0.5 ml | 1ml | 表面包被硅基的磁性颗粒 | |
| 说明书 | 1 | 1 | 1 |
注：若购买的是 BSC34S1 ，使用前请在※ 10.5ml 去蛋白漂洗液中加入 24.5ml 无水乙醇。 在※ 12.6ml 洗涤液中加入 50.4ml 无水乙醇。
若购买的是 BSC34M1 ，使用前请在※ 18.9ml 去蛋白漂洗液中加入 44.1ml 无水乙醇。 在※ 12.6ml 洗涤液中加入 50.4ml 无水乙醇。
若购买的是 BSC34S1 和 BSC34M1, 手工提取检验方法操作如下：
取3-6片3×3 mm 的干血斑样品到1.5 ml 的离心管（自备）中。
加入350 μl 的TES缓冲液。
加入10 μl 蛋白酶K 溶液，涡旋震荡10sec 混匀后，放入预热至56℃的恒温震荡器中， 900 rpm 恒温震荡45min；然后短暂离心备用。
取 300μl 上述样本处理液到一个新的1.5 ml 离心管（自备）中。
加入500μl 裂解液，剧烈振荡混匀15-20sec。
56℃温浴10分钟（注意：期间要求每隔5min颠倒混匀一次）。
将离心管从56℃温浴移开。
加入 10μl 混合均匀的磁珠，轻柔的上下颠倒混匀离心管，室温放置10min，期间每隔 2-3min 颠倒混匀。
使用磁性分离架吸附磁珠，吸弃上清，从磁性分离架上移开离心管。
加入 600μl 去蛋白漂洗液到已经吸弃上清的离心管中，颠倒离心管数次以确保磁珠完 全分散，使用磁性分离架吸附磁珠，吸弃上清，从磁性分离架上移开离心管。
加入 600μl 洗涤液到已经吸弃上清的离心管中，颠倒离心管数次以确保磁珠完全分散， 使用磁性分离架吸附磁珠，吸弃上清。
从磁性分离架上移开离心管，按照第11步重新洗涤一次。
室温开盖干燥5min。
加 50μl 洗脱液后轻柔的混合离心管，70℃温浴5分钟。注意：每隔 2-3分钟轻柔混匀。
使用磁性分离架使磁珠聚集，小心转移含有分离的DNA的上清到一干净的离心管，放入 -20 ℃ 保存备用。
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